1、将初步洗涤及切割的材料放入烧杯 , 带入超净台上,用消毒剂灭菌,再用无菌水冲洗,最后沥去水分,取出放置在灭过菌的纱布上或滤纸上 。
2、材料吸干后,一手拿镊子、一手拿剪刀或解剖刀,对材料进行适当的切割 。如叶片切成0.5cm平方的小块;茎切成含有一个节的小段 。微茎尖要剥成只含 1-2片幼叶的茎尖大小等 。在接种过程中要经常灼烧接种器械 , 防止交叉污染 。
【请教无菌接种步骤】3、用灼烧消毒过的器械将切割好的外植体插植或放置到培养基上 。具体操作过程是:先解开包口纸,将试管几乎水平拿着 , 使试管口靠近酒精灯火焰 , 并将管口在火焰上方转动 , 使管口里外灼烧数秒钟 。然后用镊子夹取一块切好的外植体送入试管内 , 轻轻插入培养基上 。若是叶片直接附在培养基上,以放1-3块为宜 。至于材料放置方法除茎尖、茎段要正放外,其他尚无统一要求 。接种完后 , 将管口在火焰上再灼烧数秒种 。并用棉塞 , 塞好后,包上包口纸,包口纸里面也要过火 。
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